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Elle permet de mettre en évidence la production d’acétoine 
    (acétyl méthyl carbinol) à partir du glucose. 
Cette voie fermentative 
    définit le groupe des KES (Klebsiella, Enterobacter,  Serratia). 
On réalise une suspension bactérienne en bouillon Clark 
    et Lubs, on incube à 37°C. Après 24-48H, on peut réaliser les réactions de 
    VP et RM. 
En milieu alcalin, l’acétoine se transforme en 
    butandione qui réagit avec l’α-naphtol et donne une coloration rouge (dont 
    l’intensité est augmentée en présence de créatine) 
NB : le test de rouge de méthyl permet de mettre en évidence l’autre grande voie fermentative des entérobactéries : voie des acides mixtes (le pH devient <4,5 et l’indicateur coloré vire au rouge)